Worthington解离酶：胰蛋白酶及常见问题

艾美捷Worthington基本概况&＃xff1a;

胰蛋白酶是一种胰腺丝氨酸蛋白酶&＃xff0c;对涉及碱性氨基酸、精氨酸和赖氨酸的羧基的肽键具有特异性。胰蛋白酶是已知的特异性最高的蛋白酶之一&＃xff0c;尽管它也表现出一些酯酶和酰胺酶活性。

单独纯化的胰蛋白酶通常对组织解离无效&＃xff0c;因为它对细胞外蛋白几乎没有选择性。纯化的胰蛋白酶和其他酶如弹性蛋白酶和/或胶原酶的组合已证明对解离有效。

“胰蛋白酶”也是商业供应商对胰酶的名称&＃xff0c;胰酶是从猪胰腺中提取的蛋白酶、多糖酶、核酸酶和脂肪酶的粗混合物。NF 1:250 是一种常用的“胰蛋白酶”制剂&＃xff0c;在国家处方集规定的测定条件下&＃xff0c;它具有蛋白水解消化 250 倍于其重量的酪蛋白的能力。重要的是要认识到这种测定程序对胰蛋白酶没有特异性&＃xff0c;尽管胰酶确实含有这种酶。尽管有命名法&＃xff0c;但像 NF 1:250 和 1:300 这样的粗制“胰蛋白酶”被广泛用于解离组织&＃xff0c;这可能是因为胰蛋白酶和污染性蛋白水解和多糖酶活性确实会优先攻击细胞外基质。

在组织培养实验室中&＃xff0c;研究人员使用纯化的胰蛋白酶将细胞从培养容器内表面上生长的单层释放到悬浮液中。大多数源自正常组织且不高度适应人工培养条件的细胞以单层形式生长&＃xff0c;即粘附在培养容器内表面上的一层细胞厚度为一个细胞。由于此类细胞更像正常组织中的细胞&＃xff0c;因此许多组织培养研究人员正在研究在单层培养中生长的细胞。

单层培养物通常在玻璃或聚苯乙烯滚瓶、培养瓶或培养皿中生长。用于组织培养工作的塑料容器经过特殊处理&＃xff0c;以确保细胞良好地粘附在容器壁上。

用于细胞分离程序的一些J常用的纯化胰蛋白酶等级是 艾美捷Worthington代码&＃xff1a;TL、TRL、TRLS 和 TRLVMF。这些适用于细胞收获以及组织解离。

组织表&＃xff08;参考&＃xff0c;按组织类型和物种分组&＃xff09;

脂肪/脂肪 肾上腺 骨 脑

软骨 冒号 内皮 上皮

眼睛 心 肠 肾

肝 肺 淋巴结 乳腺

各种各样的 肌肉 神经 胰腺

腮腺 垂体 前列腺 生殖

秤 皮肤 脾 干

胸腺 甲状腺/甲状旁腺 扁桃体 瘤

需要注意的是&＃xff1a;一般而言&＃xff0c;Worthington 提供的组织解离酶可互换用于所引用的大多数制剂。

Worthington核心酶&＃xff1a;包括&＃xff1a;胶原蛋白酶&＃xff0c;脱氧核糖核酸酶I&＃xff0c;弹性蛋白酶&＃xff0c;木瓜蛋白酶&＃xff0c;核糖核酸酶&＃xff0c;胰蛋白酶等。